我国学者发现肝癌治疗新型ceRNA调控靶点

肝细胞癌（HCC）是原发性肝癌的主要类型，在我国肝癌患者中占75%～85%^[1]。近年来，尽管对HCC的诊断和治疗策略有了长足进展，进一步提高患者预后的研究却并未止步，深入阐明HCC发病和进展的肿瘤特异性机制，对于寻找HCC新的治疗靶点、制定治疗策略至关重要。其中，关于非编码RNA（ncRNAs）在HCC癌变中的重要作用越来越引起人们的关注。

2011年，Salmena等人提出了一个竞争性内源RNA（ceRNA）的假说，即mRNAs、长链非编码RNA（lncRNAs，>200 bp）和其他ncRNAs共享同一个miRNA应答元件（MREs），它们通过与靶向mRNA上的MREs竞争性结合，来抑制miRNA的生物功能^[2]。新的研究表明，lncRNAs在细胞质中可以维持mRNA的稳定或作为ceRNA来调节蛋白质水平^[3]。

由于lncRNAs和mRNAs具有良好的特异性和可及性，能否将其作为肝癌潜在的诊断、预后预测的生物学标志物已成为该领域的一大研究热点。近日，中国中医科学院中药研究所张彦琼研究员及其团队通过研究，发现了一个新的lncRNA-TUG1-microRNA-328-3p-SRSF9 mRNA轴参与HCC的发生，从而为HCC的靶向预后和治疗提供了有意义的线索^[4]。该项研究成果发表在肿瘤学基础研究领域的顶级期刊Molecular Cancer杂志（IF：27.401；CR分区：Q1）。

（文章发表封图）

LncRNA TUG1‑miR‑328‑3p‑SRSF9 mRNA轴的失调与HCC进展、患者预后相关

图1. 基于293 T细胞进行双荧光素酶报告基因分析，矩形标记的基因序列表明SRSF9 mRNA和lncRNA TUG1与miR-328-3p具有相同的结合位点

A. 与相应的非癌肝组织（n=56）相比，HCC组织（n=77）中SRSF9 mRNA、miR-328-3p和lncRNA TUG1的相对表达水平。与非癌组相比，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。B. HCC样本SRSF9 miR-328-3p和SRSF9 mRNA表达水平之间，以及SRSF9 mRNA和lncRNA TUG1表达水平之间的Kandall和Spearman相关性分析。C. SRSF9 mRNA表达可能与HCC患者的总生存率和无病生存率显著相关。D. lncRNA TUG1-miR-328-3p-SRSF9 mRNA轴参与HCC进展的示意图模型。E、F、H、I，SRSF9过表达逆转miR-328-3p在HUH7细胞增殖和迁移活动中的肿瘤抑制作用。G、J、K， 流式细胞仪检测pre-SRSF9 mRNA mimics-miR-328-3p转染的HUH7细胞的细胞凋亡和细胞周期。

SRSF9 mRNA的抑制和miR-328-3p的上调能有效抑制HCC细胞的增殖、迁移和细胞周期，并诱导HCC细胞凋亡

SRSF9修复逆转miR-328-3p对HCC细胞的抑制作用

为了验证miR-328-3p对SRSF9 mRNA在体外发挥抗肝癌作用时的调节作用，研究人员构建了miR-328-3p和SRSF9 mRNA共过表达质粒，并分别导入HUH7和MHCC97H细胞。结果发现，导入miR-328-3p和SRSF9 mRNA共过表达质粒的HCC细胞中SRSF9蛋白的表达水平明显高于单独使用miR-328-3p过表达质粒的HCC细胞。在功能上，与对照组相比，在HUH7和MHCC97H细胞中单独上调miR-328-3p，导致HCC细胞增殖能力下降、细胞凋亡增多，以及细胞迁移潜能的下降；与此相反，在HUH7和MHCC97H细胞中共转染miR-328-3p和SRSF9 mRNA，获得了相关参数的显著逆转。

LncRNA TUG1通过结合miR-328-3p，可消除miRNA-328-3p对SRSF9 mRNA的负调控

为了进一步验证lncRNA TUG1在影响miR-328-3p对HCC中SRSF9 mRNA的干预作用，研究人员将过表达miR-328-3p和lncRNA TUG1的质粒共转染到HUH7和MHCC97H细胞中，结果表明，SRSF9蛋白的表达水平明显高于单独使用miR-328-3p过表达质粒的表达水平，这意味着lncRNA TUG1可显著降低miRNA-328-3p对HCC细胞中SRSF9表达的负调节作用。与miR328-3p和SRSF9 mRNA共过表达组的研究结果相似，miR-328-3p和lncRNA TUG1的联合过表达显著减弱了miR-328-3p在HCC细胞中的肿瘤抑制作用。