肿瘤基因检测和免疫表达是什么？

        那什么是肿瘤基因检测和免疫表达呢？对于绝大部分刚确诊的病友和家属，对此是完全陌生的。今天小编就肿瘤基因检测和免疫表达内容做一下科普，尽量用通俗易通的话术，让大家容易理解。

肿瘤基因检测概念

        首先说说肿瘤基因检测，通常所说的肿瘤基因检测是指通过对肿瘤患者样本中的遗传物质（基因）进行分析，寻找靶向药物及免疫药物的用药证据。具体是指，检测是否存在相关基因突变，突变的基因是否能匹配上相应的靶向药物，比如在肺癌组织样本中测到EGFR基因19号外显子缺失突变，就可以匹配上使用EGFR基因对应的药物，如吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼、奥希替尼等。基因检测来测免疫治疗相关的指标，如TMB、MSI，看是否更适合进行免疫药物治疗，比如检测发现TMB值达到50个突变/Mb，或者检测发现MSI微卫星不稳定性结果是微卫星高度不稳定型（MSH），那么这两种情况就比较适合用免疫治疗药物，比如用PD1抗体类或者PD-L1抗体类药物进行治疗。反之，TMB值很低如2个突变/Mb，或者微卫星稳定型，就不怎么推荐免疫药物治疗。

肿瘤基因检测样本类型

        肿瘤基因检测，最常用的样本是组织样本，组织样本主要包括新鲜组织样本、组织蜡块、组织白片、组织蜡卷等都可以用于基因检测。新鲜组织样本若考虑直接送检，一般将活检取到的新鲜组织直接放入中性福尔马林保存液中保存送检，或者新鲜组织也可以用干冰保存送检，当然用福尔马林液保存会更方便些。通常情况下，组织样本活检后会被送到医院病理科，经过福尔马林固定，有机溶剂脱水处理，然后置于液态的石蜡中，液态石蜡冷却凝固后就把组织样本包裹在里面，这个过程称为组织样本的石蜡包埋，得到的组织蜡块样本可以长期保存。在此，小编建议做基因检测的时候，尽量避免送检蜡卷，因为蜡卷无法做病理评估，无法确定送检样本中的肿瘤细胞占比，一定程度上导致样本质量控制流程不完善，影响结果评估。

        另外胸水、腹水、脑脊液、心包积液、血液等也是基因检测非常常用的样本。其中组织样本是基因检测的金标准，在暂时无法获取组织样本时，可以考虑其他样本检测，一般情况下，组织样本阳性率高于恶性渗出液（如胸水、腹水、脑脊液、心包积液等），而恶性渗出液的检测阳性率一般高于血液，当然毫无疑问血液是最容易获取的。

肿瘤基因检测常用方法

        基因检测目前最主流的方法是二代测序（NGS，Next-Generation Sequencing），另外还有聚合酶链式反应（PCR）、一代测序（Sanger法）、荧光原位杂交法（Fish）等方法，其中更建议用二代测序来做，其他方法虽然各有一定的优势，但是综合考虑二代测序更优，可以尽量避免检测中可能的遗漏，其他方法可作为补充。

检测内容的选择

        在选择检测内容的时候，小编认为首先需要考虑进来的因素是经济压力的问题。在经济很困难的情况下可以考虑选择基因数量少些，几个或者十几个基因的基础套餐（所谓的小Panel）；在经济稍微能接受的情况下，可以选择几十个或者一百多个基因的套餐（所谓中型Panel）；在经济宽裕的情况下可以选择几百个基因的大套餐（大Panel）；另外在经济还允许，预期较大概率可以继续用靶向药物的情况下，建议选择一个可以做多次检测的套餐，看似一次性多掏了些钱，实际上长期看确实是节约费用的。至于经常会有病友说：“有药的靶点就这么多，测常见的八个基因就够了，多了也没有药用或者药也用不起。”这个说法到底是否可取？咱们要辩证的看待这个问题。还是本段开头说的，首先考虑的是经济压力的问题，你说真是连药都吃不起了，还考虑测什么大套餐呢？不过说回来，大些的套餐还是有大些套餐的价值所在，比如和基础套餐比，一般中型套餐会尽可能的把能用的靶向药物靶点涉及上，包括一些不常见不过已经审批的靶点（如NTRK），或者包括在其他癌种中已经审批的药物靶点或者已经有临床试验项目的靶点，以及包括相关药物耐药机制相关的基因。再大些的大套餐，一般还包括免疫治疗的指标TMB，更多的包括可能引发免疫超进展相关的基因或者免疫获益相关的基因。在自身能力范围内，尽可能选择一个适合自身检测的套餐。

免疫表达

        再说说什么是测免疫表达？这里所说的免疫表达特指检测PD-L1蛋白的表达。在生物学上我们把基因控制合成相应功能蛋白的过程称为基因表达，而这个故事的主角就是PD-L1蛋白（程序性死亡受体-配体1）。这个蛋白是干嘛用的呢？通常情况下一般的细胞包括肿瘤细胞是不具有PD-L1蛋白的，而部分肿瘤细胞很狡猾，会通过自身的调节在细胞表面表达产生PD-L1蛋白，这个PD-L1蛋白干嘛用的呢？它会和免疫细胞表面的PD1蛋白发生作用，抑制、麻痹免疫细胞，让免疫细胞无法很好识别出肿瘤细胞，正常情况下免疫细胞是可以识别肿瘤细胞的，这种情况下免疫细胞无法识别肿瘤细胞，就无法消灭肿瘤细胞，从而肿瘤细胞在体内发展壮大，这也是肿瘤发生的机制之一。而我们用上免疫药，比如PD1抗体（和免疫细胞PD1结合）或者PD-L1抗体（和肿瘤细胞的PD-L1结合），就把肿瘤细胞通过以上方式抑制、麻痹免疫细胞的方法给破解了，这样一来免疫细胞就可以顺利把肿瘤细胞识别并消灭掉。当然并不是所有的肿瘤细胞都是通过这种方式起作用的。因此，我们需要通过检测来辨别哪些个体的肿瘤是通过这种方式起作用的，从而来选择是否适合使用免疫治疗药物，PD-L1表达越高（含有PD-L1蛋白的肿瘤细胞占比越多），意味着免疫治疗可能有效率越高。

        测PD-L1表达所用的方法是免疫组化，这和基因检测所用的方法不同，和平时病理科做病理所用的方法是一样的。PD-L1表达检测需要用组织白片，或者大量恶性渗出液离心包埋蜡块然后切取白片也可以测（不过前提是里面含有足够肿瘤细胞），而血液样本目前是无法测PD-L1表达的，因为血液中基本上很难分离足够量的肿瘤细胞并检测PD-L1蛋白。

        补充一下，我们检测PD-L1表达，而不测PD1表达，很多朋友也容易搞混淆。由以上机制看出，PD-L1蛋白存在于肿瘤细胞表面，而PD1蛋白存在于免疫细胞表面，我们是去寻找肿瘤细胞的特征，而不是免疫细胞的特征，所以不测PD1表达。另外加一点，关于TMB、MSI、PD-L1表达三个指标可以单独使用，任何一个指标合适了就可以考虑免疫治疗，当然有靶向药一般情况下会先考虑靶向治疗。基因检测机构的选择尽量选择权威的基因检测机构来做基因检测。懂的朋友自己找几份基因报告好好看看内容，看看形式，看看参数等，基本也就差不多了。完全不懂的朋友，找老病友或者家属多去打听打听，选择业内知名的机构来测（大家都说测得准的机构），尽量避开不入流的机构，测不准，还耽搁治疗时间。